Souris BRGS TSLP
Souris immunodéficiente pour la recherche en immuno-oncologie
Caractéristiques du modèle
Type :
Souris consanguine mutante, Mus musculus, OGM
Utilisation réservée aux utilisateurs du secteur privé
Modèle :
Provenance :
Institut Pasteur, 2022
Couleur et Génotype associée :
Souris albinos
Performance de reproduction :
Cryo, In vitro, In vivo
Présentation du modèle et domaines d’application
La souche BRGS TSLP ou souche Balb/c Rag2 γc Sirpα TSLP est un modèle consanguin (fond Balb/c) sévèrement immunodéficient avec 2 mutations génétiques knock out (KO) et un gène de fonds NOD : le gène γc KO (Interleukin 2 receptor gamma chain, IL2rgTm1), le gène Rag2 KO (recombinase 2 activating gene), et le gène Sirpα (fond NOD). Ce modèle porte également un transgène exprimant la molécule : la lymphopoïétine dérivée des cellules thymiques-stromales.
La mutation Rag2Tm1, communément appelée Rag2, est une mutation KO du gène codant pour l’enzyme recombinase 2, qui joue un rôle clé dans la génération des récepteurs T et B des lymphocytes. Cette absence bloque le développement des lymphocytes T et B et induit un déficit immunitaire. Les souris homozygotes pour cette mutation présentent une absence totale de lymphocytes T et B en périphérie.
La mutation IL2rgTm1 dite γc est une mutation KO du gène codant pour la chaîne gamma c commune aux (entre autres) interleukines (IL-2, IL-4, IL-7, IL-9 et IL-15). Ce gène est nécessaire à la différenciation et à la fonction de nombreuses cellules hématopoïétiques, avec un impact complet sur le développement des cellules Natural Killer (NK).
La combinaison de ces deux mutations, Rag2Tm1–IL2rgTm1, induit une immunodéficience sévère avec absence des compartiments lymphocytaires T, B et NK.
La souche BRGS TSLP porte le gène Sirpα du fond NOD avec un polymorphisme particulier. L’expression de la protéine Sirpα (allèles du fonds NOD) à la surface des macrophages de la moelle osseuse permet une liaison de haute affinité avec les marqueurs CD47 des cellules hématopoïétiques humaines.
Cette liaison induit un signal ” ne me mange pas ” qui bloque les macrophages murins et empêche la phagocytose des cellules humaines transplantées.
Il s’agit d’une caractéristique notable du fonds NOD (transféré par backross à des mutants BRG Balb/c) qui lui confère un avantage dans la transplantation humaine et la xénogreffe en général.
La souche BRGS TSLP porte le transgène TSLP, lymphopoïétine dérivée des cellules thymiques-stromales, pour restaurer le développement des ganglions lymphoïdes secondaires absents dans les modèles dits γc KO (Interleukin 2 receptor gamma chain, IL2rgTm1) et quel que soit le fond génétique. Cette absence de ganglions périphériques est liée à l’absence d’inducteur de tissu lymphoïde dépendant des signaux médiés par les récepteurs γc.
La souche BRGS TSLP se distingue des souches NXG (NOD-Prkdcscid–IL2rgTm1/Rj) par l’absence de la mutation Prkdcscid, communément appelée ” SCID ” pour Severe Combinated Immunodeficiency. La souche T BRGS est donc plus résistante à l’irradiation, à l’injection de produits génotoxiques et au stress, conférant une utilisation plus stable et durable à la xénogreffe en général, et porteuse de ganglions périphériques, permettant une optimisation des xénogreffes du système immunitaire humain, en augmentant la qualité, la quantité et la fonctionnalité des acteurs de l’immunité.
JANVIER LABS a acquis la licence du modèle de souris BRGS TSLP auprès de l’Institut Pasteur. L’utilisation de cette souche est réservée aux utilisateurs du secteur privé.
Les animaux sont élevés pour maintenir à la fois le fonds génétique et les mutations d’intérêt dans leurs formes homozygotes. Le modèle de souris BRGS TSLP est élevé en mode consanguin et le phénotype est contrôlé conformément à la POLITIQUE GÉNÉTIQUE® de JANVIER LABS.
Principales applications et domaines de recherche
Caractérisation phénotypique
Ce modèle a été entièrement caractérisé. Les paramètres immunologiques et hématologiques ont été analysés par le Centre Immunophénomique (Ciphe) de Marseille en France.
Analyse en cytométrie en flux, rate
Analyse représentative par cytométrie de flux confirmant l’absence de cellules B positives (CD19), de cellules T positives (CD4 et CD8) et de cellules NK (CD335) dans le sang périphérique des souris BRGS TSLP.
- Les intensités de fluorescence (MFI) représentent les expressions spécifiques des groupes de différenciations.
- On obtient des nuages de points, chaque point représentant une cellule.
- On peut alors déterminer les cellules négatives/simples et positives/doubles positives dans chaque population (définie par ” Cluster of Differentiation “), en fixant ou non les deux anticorps portant les fluorochromes.
Observations phénotypiques / physiologiques
Les souris BRGS TSLP sont viables, fertiles, de taille normale et ne présentent aucune anomalie physique ou comportementale évidente.
Les taux du modèle de souris BRGS TSLP étaient élevés dans le sérum des souris BRGS TSLP adultes exprimant le TSLP de souris piloté par le promoteur K14 par rapport à ceux des souris BRGS TSLP. Alors que les sous-ensembles de cellules NK et ILC (cellules lymphoïdes innées) de l’intestin étaient gravement appauvris chez les souris BRGS TSLP Il2rg-/- par rapport aux nombres de souris Rag2-/-, les souris BRGS TSLP ont montré un meilleur développement ILC sans effet sur les cellules NK, ce qui suggère que TSLP complète les voies de signalisation IL-7 in vivo. Des études antérieures ont montré que la surexpression de TSLP peut restaurer la fonction des cellules de l’inducteur du tissu lymphoïde (LTi) chez les hôtes Il2rg-/-.
Ces résultats ont été confirmés chez des souris BRGS TSLP, chez lesquelles des anlagenes de ganglions lymphatiques (LN) se sont solidement développés dans tout le corps.
Les quelques anlagènes LN chez les souris BRGS TSLP étaient plus petits que ceux des souris BRGS TSLP et n’étaient visibles que par coloration.
En revanche, le développement défectueux des plaques de Peyer (PP) secondaire à l’inactivation de Il2rg n’a pas été corrigé par la surexpression de TSLP.
Les souris BRGS TSLP sont déficientes en lymphocytes matures, et les immunoglobulines sériques ne sont pas détectables. Ces souris sont résistantes au développement de lymphomes, même après un traitement par rayonnement sublétal. Il a été démontré que ces souris mutantes supportent facilement la transplantation de cellules souches hématopoïétiques CD34+ humaines et représentent un modèle supérieur à longue durée de vie adapté aux études utilisant des stratégies de xénotransplantation.
Origine / Création
Le modèle BRGS TSLP a été généré à l’Institut Pasteur.
L’expression du transgène TSLP est sous le contrôle du promoteur K14, et a été créé précédemment sur le fonds génétique C57BL/6.
Les souris transgéniques TSLP ont été croisées (> 10 générations) avec la souche Balb/c Rag2−/−Il2rg−/−Rag2 γc Sirpα (BRGS) pour créer des hôtes BRSG (BRGST) transgéniques TSLP.
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